近年来,随着酶底物法检测总大肠、大肠埃希氏菌、粪(耐热)大肠菌群的实验方法逐渐被普及。酶底物检测方法需要配合程控定量封口机使用,其中在实验过程中使用到的51孔定量培养过待测大肠菌群水样后,需要对照相应的MPN表来查看得出实验结果。
那么,对于初次使用酶底物法检测仪器的实验人员来说,猛的一看MPN表可能会觉得数字那么多,不知道该如何查看,接下来小编就来教大家怎么查看酶底物法51孔97孔定量盘MPN表。
酶底物法检测方法采用大肠杆菌产生β-半乳糖苷酶分解色源底物-ONPG(Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside)使培养液呈黄色。大肠埃希氏菌产生β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase)分解MUG(4-methyl-umbelliferyl-β-glucuronide)使培养液在波长366 nm紫外光下产生荧光的原理,来定性定量水中总大肠菌群、粪大肠菌群(耐热大肠菌群)及大肠埃希氏菌。
该方法操作简便、实验周期短并且对实验人员要求也不高,实验人员在检测大肠菌群实验过程中,由于定量盘内添加有大肠菌群检测试剂,将检测盘从培养箱中取出后,如果孔格不显色,就说明检测结果为阴性;如果孔格显示黄色,则说明总大肠菌群检测结果为阳性;另外,如果孔格显示黄色并且在紫外分析仪下显荧光,则说明大肠埃希氏菌群检测结果为阳性,我们就需要计算阳性孔格数。
其实,我们在对照酶底物法检测大肠菌群MPN表的查看方法非常简单。在我们计算完定量盘上的阳性孔格数后,51孔定量盘直接按照孔格数对照表即可得出实验结果;97孔定量盘需要分别计算阳性大、小孔格数,然后在二维表格中查找对照即可得出准确的实验结果。
一般其概况下,实验结果的单位是以MPN/100ml,即cfu/ml,该数值就代表了大肠菌群的浓度。51孔定量盘的检测范围是0-200MPN,97孔定量盘的检测范围是0-2419MPN。下面我们就举例说明:比如在51孔格定量盘中查有13个孔格数显色为黄色,而在紫外分析仪下无荧光色孔格,在查表可得出,该水样总大肠菌群浓度值为15.0MPN/100ml。97孔定量盘检测也是同样的道理即可得出实验结果。
51孔定量盘使用MPN表
(点击查看大图)
97孔定量盘使用MPN表
(点击查看大图)
97孔定量盘MPN表2
(点击查看大图)
以上就是关于如何查看酶底物法检测大肠菌群实验结果的方法,通过以上内容我们可以看出,酶底物法相较于传统的滤膜法、多管发酵法,无论是从实验过程还是实验结果的判定都比较省时省力,而且误差较小,小编也在此建议有条件的实验室可以尝试采用酶底物法进行水中大肠菌群的测定。